各位看看我的引物酶切位点和保护碱基有什么问题吗

2022-08-29 00:20

5’-CCTGAATTCATGGCTAGCCTTCTCA-3’5’-CCGCTCGAGTATTTA ATTGAATAGTT-3’

2个回答

还可以，但是要注意退火温度，还有3‘端尽量避免a t

你加的是EcoRI和XhoI位点把？酶切位点和保护碱基都没问题，不过要指出一点，避免3'端出现A或T，最好是C或G，是A或T的话扩增效率比较低。

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2个回答2022-09-05 08:06

这种情况一般和酶切位点关系不大。你应该首先确定在不加酶切位点的情况下，是否能做出PCR。加上酶切位点对PCR的条件影响并不大。如果在没有酶切位点的情况下，还做不出，那说明你要么是底物浓度太低，或者引物...

1个回答2022-09-03 15:43

基本上设计引物的时候用primer5看看就差不多了，没有非特异没有自身二级结构，然后TM计算就是AT加2GC加4，加在一起就是TM退火温度……不要有连续5个以上一样的碱基，碱基分布均匀一些……就差不多...

1个回答2022-11-11 10:26

限制酶切位点的保护碱基，一般首先要考虑限制酶的特异性，决定添加数目和序列，同时还要考虑两条引物的Tm值和各引物的碱基分布及GC含量，以优化PCR和后续酶切。是具有一定特异性和功能性的。taq在加A是没...

2个回答2022-07-04 04:40

你看看新加进去的酶切位点和保护碱基是不是能和你的基因片段匹配，如果匹配程度高的话，或者引物内部产生颈环结构的话，可能会造成扩增产物的异常。

4个回答2022-06-11 02:21

你想问什么？

1个回答2024-01-29 16:18

帮助孩子学会保护自己是家长应该关注和重视的问题，以下是一些方法： 1. 培养孩子的自我保护意识：家长应该让孩子明耐悉迟白保护自己的重要性，告诉他们遇到危险时应该怎么做。例如，学会说“不”，学会向身边...

1个回答2023-09-25 04:11

单个替换可以，但不是A=C。比如燃如在复制或转录的时候，一条链氏汪上的A可以替换成C，另一条单链正常。那么突变后转录来的RNA相应的U变成G，歼橡仔复制来的DNA单链T变成G。

1个回答2024-02-29 06:33

一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并能在特定的切点上切割DNA分子

1个回答2022-09-12 15:46

遗传信息的基本单位。一般指位于染色体上编码一个特定功能产物(如蛋白质或RNA分子等)的一段核苷酸序列。碱基共有5种：胞嘧啶（缩写作C）、鸟嘌呤（G）、腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T，DNA专有）和尿嘧啶...

1个回答2023-01-02 17:00

大约20000到25000个基因。人类基因组，又称人类基因体，是指人的基因组，由23对染色体组成，其中包括22对体染色体、1条X染色体和1条Y染色体。人类基因组含有约30亿个DNA碱基对，其中一部分...

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