提取的DNA模版浓度均低于50ng/ul,做25微升体系的PCR,模版应该加多少微升?

2022-12-19 00:20

2个回答
可以稍微大一点,加3ul试一试,不过模板这个要求不太高,关键是你的引物设计的质量还有DNA聚合酶的活性,据说不是有人做过“单分子PCR”吗?
而且委屈委屈委屈委屈委屈委屈委屈我
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pcr反应模板DNA浓度最低要求是多少?
3个回答2023-04-12 10:46
模板DNA浓度主要看你的PCR扩增体系所使用的酶,一般普通的酶的话DN模板量在50到100ng都可以扩增出来的,高效一点的酶的话几ng也可以扩增出来的。
为什么pcr的时候,DNA模板浓度高了,会有拖尾?
2个回答2023-04-04 17:36
DNA模板浓度高了,不仅会有拖尾,还可能会没有PCR条带。 特别是在DNA模板纯度不纯的时候,会对PCR起抑制作用。 PCR反应中,模板只要1ng就可以,所以模板浓度不要太高。
模板的浓度对PCR有什么影响,一般要多大浓度?
2个回答2022-12-21 18:32
要看用的是什么模板了,pcr的灵敏度很高,几pg的DNA就能检测出来,一般用pcr产物或者质粒做模板,只需要1ng左右就可以,如果是基因组或者cDNA做模板,模板量可适当增加。 PCR指聚合酶链式反应...
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模板的浓度对PCR有什么影响,一般要多大浓度?
1个回答2022-12-19 00:20
那要看你用的是什么模板了。 pcr的灵敏度很高,几pg的DNA就能检测出来了。一般用pcr产物或者质粒做模板,只需要1ng左右就可以了,如果是基因组或者cDNA做模板,模板量可适当增加。
我想问PCR扩增时使用的DNA模板浓度一般多大?加多少?
1个回答2022-12-19 00:20
我们一般不去特意检测提取的得到的模板浓度,纯度倒是要注意一下,紫外分光达到1.8即可,不过我们一般也不去检测. PCR的时候可以设置梯度,分别加0.5μl,1μl,1.5μl,2μl,2.5μl,3μ...
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2个回答2022-06-22 03:16
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