T4连接后的验证,验证是否连接上
1个回答
1、进行PCR,这时候的引物我用的是我之前P目的基因时的引物,这样对吗?
答:这样是可以的,可以省掉一些新的引物
2、我要进行验证我是否连接上,进行PCR时是否应该重新设计新的引物,如果用原来P目的基因的引物是什么?
答:我没用过121载体,但一般载体都有通用引物,可以验证有无连接载体
3、如何进行T4连接后的验证?
答:(1)最简单是跑焦啦,与空载比较
(2)酶切后跑胶,有无2条或3条带,这是正规做法
答:这样是可以的,可以省掉一些新的引物
2、我要进行验证我是否连接上,进行PCR时是否应该重新设计新的引物,如果用原来P目的基因的引物是什么?
答:我没用过121载体,但一般载体都有通用引物,可以验证有无连接载体
3、如何进行T4连接后的验证?
答:(1)最简单是跑焦啦,与空载比较
(2)酶切后跑胶,有无2条或3条带,这是正规做法
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