PCR时人模板DNA的量加到5μg会不会有点多? 用的是TaKaRa Taq,50ul的反应体系
我是问会不会太多,听人说模板太多了对PCR反应也会有影响
1个回答
试试吧,理论上一条DNA链就能PCR
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pcr反应模板DNA浓度最低要求是多少?
模板DNA浓度主要看你的PCR扩增体系所使用的酶,一般普通的酶的话DN模板量在50到100ng都可以扩增出来的,高效一点的酶的话几ng也可以扩增出来的。
为什么pcr的时候,DNA模板浓度高了,会有拖尾?
DNA模板浓度高了,不仅会有拖尾,还可能会没有PCR条带。 特别是在DNA模板纯度不纯的时候,会对PCR起抑制作用。 PCR反应中,模板只要1ng就可以,所以模板浓度不要太高。
我想问PCR扩增时使用的DNA模板浓度一般多大?加多少?
我们一般不去特意检测提取的得到的模板浓度,纯度倒是要注意一下,紫外分光达到1.8即可,不过我们一般也不去检测. PCR的时候可以设置梯度,分别加0.5μl,1μl,1.5μl,2μl,2.5μl,3μ...
全文我想问PCR扩增时使用的DNA模板浓度一般多大?加多少?
我们一般不去特意检测提取的得到的模板浓度,纯度倒是要注意一下,紫外分光达到1.8即可,不过我们一般也不去检测。 PCR的时候可以设置梯度,分别加0.5μl,1μl,1.5μl,2μl,2.5μl,3μ...
全文模板的浓度对PCR有什么影响,一般要多大浓度?
要看用的是什么模板了,pcr的灵敏度很高,几pg的DNA就能检测出来,一般用pcr产物或者质粒做模板,只需要1ng左右就可以,如果是基因组或者cDNA做模板,模板量可适当增加。 PCR指聚合酶链式反应...
全文模板的浓度对PCR有什么影响,一般要多大浓度?
那要看你用的是什么模板了。 pcr的灵敏度很高,几pg的DNA就能检测出来了。一般用pcr产物或者质粒做模板,只需要1ng左右就可以了,如果是基因组或者cDNA做模板,模板量可适当增加。
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全文pcr的反应条件是什么
PCR反应条件为温度、时间和循环次数。
DNA电泳和浓度测量都很好,为什么PCR扩不出来 ?用相同的体系和程序以前提取的DNA能扩出来,为什么?
那我建议你用以前的DNA作为阳性对照同时做一管,这样才能知道除DNA模板以外,其他试剂没有问题。这时候才要考虑是DNA模板的问题。 因为PCR反应的条件不仅受到DNA模板的影响,还有其他因素,如: 引...
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