问个问题哦,我进行的是原核蛋白表达,表达载体是PET32a,表达菌液超声后在上清电泳条带很好,可是没有酶活

2023-10-24 20:18

是冰浴超声,并且功率为400,请高手指点啊!!!
2个回答
你了解下你表达的蛋白是个什么情况,有没有修饰,也许不是你处理过程的问题,而是原核表达本身没有活性啊
首先得判断蛋白条带是否正确,因为32a表达过程中,会在目标蛋白上加上部分自衡数局己序列,所以电泳图谱中你所要表达的蛋白,应该比你自己预期的大20-30kDa。
其次,原核表达,只是表达了酶蛋白序列,但蛋白序列与酶之间不能划等号,要有一个正确的加咐让工之后形成合适的二、三级结构,蛋白才有毕粗活性
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