质粒载体如何构建

2022-09-07 05:22

3个回答

PCR 酶切连接转化涂板摇菌提质粒。。。。

首先需要一个表达载体，看你需要原核还是真核，看情况选择，然后有获得你需要的目的基因，在两端加酶切位点，将目的基因与载体连接到一起后就完成了质粒载体的构建了。

你的质粒载如果是克隆型的，那么必须有：复制起始和终止位点、多克隆位点、标记位点、分子量小、易分离等特点。如果是表达型的则必须有：转录起始位点，也就是要有启动子和终止子等。

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1个回答2022-08-02 04:23

天然存在的野生型质粒由于分子量大、拷贝数低、单一酶切位点少、遗传标记不理想等缺陷，不能满足克隆载体的要求，因此往往需要以多种野生型质粒为基础进行人工构建。目前实验室使用的大肠杆菌质粒大多是由少数几个野...

1个回答2022-08-02 05:04

不同类型的质粒有不同的构建方案。测序的话，将目的片段克隆到引物序列下游就好；而表达质粒还要求有正确的阅读框架

1个回答2023-01-03 12:31

看看生物通吧

1个回答2022-07-30 23:33

质粒是指细菌细胞质中的小型环状DNA分子,主要控制细菌的次级代谢载体是指在基因工程中用以协载目的基因的小型环状DNA分子,载体一般是经过改造的质粒,还可以是动植物病毒的DNA

1个回答2022-09-24 01:30

原子，分子和离子.

2个回答2023-02-22 03:20

我们所说的质粒是指细菌细胞质中的小型环状DNA分子,其作用是控制细菌的次级代谢，而载体是指在基因工程中用以协载目的基因的小型环状DNA分子，载体一般是经过改造的质粒，还可以是动植物病毒的DNA，丰晖...

3个回答2022-06-28 07:59

质粒是指细菌细胞质中的小型环状DNA分子,主要控制细菌的次级代谢载体是指在基因工程中用以协载目的基因的小型环状DNA分子，载体一般是经过改造的质粒，还可以是动植物病毒的DNA

1个回答2022-10-24 06:29

PCR产物一般和 T载体相连，T载体是一种线性载体，和你的目的片段连接以后，就变成了圆形的质粒。 T载体的种类很多，takara的书上有很多介绍。

1个回答2022-08-13 05:16

构建载体就是把目标DNA、载体、DNA连接酶、酶的buffer放到一起，然后4度连接过夜就行了。上面各个东西的用量，你可以参考连接酶的说明书。如果你是想连T载体的话，就可以直接拿PCR产物和载体连，如...

1个回答2023-01-18 18:55

同样的问题,我也正经历着,别着急慢慢分析原因. 如果你做得是质粒的构建,我想根本的原因是没有连接上,那得重新做,考虑连接的问题. 对于你的那个5天得菌液,原则上说菌液放久了,质粒可能会丢失,你可以重新...

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