外源性基因与载体的连接方式哪四种
1个回答
还真是个问题,我的理解可能不是你要的答案。
首先是T,A连接,就是现在通常使用的T载体,一般的PCR产物都在两端加个A,这样T,A相配,T4连接酶可以把他们连在一起。
第二,粘性酶切位点连接,把载体和外源基因用相同的酶进行酶切(双酶切,或者单酶切都可以)回收相应的片段,用酶切出来的粘性末端进行配对,T4连接酶进行连接。
第三,平末端连接,也是用酶切,平末端也可以用T4连接酶连接,不过连接效率低的很。
第四,同源重组,用一个含有目的基因的载体A和另外一个载体B共转染(转化)宿主,可以通过同源重组产生包含目的基因的B载体。多用在病毒载体和重组病毒的构建上。
首先是T,A连接,就是现在通常使用的T载体,一般的PCR产物都在两端加个A,这样T,A相配,T4连接酶可以把他们连在一起。
第二,粘性酶切位点连接,把载体和外源基因用相同的酶进行酶切(双酶切,或者单酶切都可以)回收相应的片段,用酶切出来的粘性末端进行配对,T4连接酶进行连接。
第三,平末端连接,也是用酶切,平末端也可以用T4连接酶连接,不过连接效率低的很。
第四,同源重组,用一个含有目的基因的载体A和另外一个载体B共转染(转化)宿主,可以通过同源重组产生包含目的基因的B载体。多用在病毒载体和重组病毒的构建上。
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全文载体上链接外源基因时怎么补齐碱基
对于一个细胞来说,内源DNA是其基因组的序列(本身生物就有的DNA),而外源的DNA是通过基因工程导入的其他物种或细胞的DNA,也可以是人工合成的一段DNA。
载体DNA与外源基因链接的方法有哪几种
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基因工程中,载体与载体连接物,目的基因与目的基因连接物,目的基因与载体连接物分别是指什么,满意的话
经过同一种限制性内切酶切割后会产生相同的粘性末端,所以目的基因可与目的基因连接,载体可与载体连接,也有目的基因和载体连接。 用限制性内切酶切了以后,让片段自己连接,就会出现三种连接方式,然后我们选择...
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外源基因连接T载体导入到大肠杆菌,那么外源基因能在大肠杆菌中表达吗?
可以的,因为它上面有启动子T7/SP6(哪个我忘记了)。 但是T载体一般不用做表达载体,因为它是靠T-A连接的(T载体上含多个T,PCR产物含多聚A),读码框未必正确,所以一般是用作中间过渡的载体,后...
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全文基因克隆载体连接步骤
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