从高等生物基因组中克隆的完整基因为什么在大肠杆菌中不能正确表达?

2022-10-08 09:44

原题如下:从高等生物基因组中克隆的完整基因为什么在大肠杆菌中不能正确表达?如果想让人的胰岛素基因在细菌中表达生产人胰岛素,至少应满足那些条件? 跪求答案,急!
1个回答
真核生物与原核生物的启动子不同。而且真核生物的基因通常是间隔基因,即外显子和内含子相间排列。真核生物的完整基因直接转入大肠杆菌,没用相应的启动子不能启动mRNA转录,而且内含子也不能正确剪切,当然不能正确表达。
利用胰岛素的mRNA进行RT-PCR,扩增出它的cDNA,再将cDNA连接在有完整表达单元的载体上,转入细菌中表达。
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为什么基因测序前将基因PCR克隆后还要放到大肠杆菌
1个回答2022-12-05 23:10
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导入到大肠杆菌,那么外源基因能在大肠杆菌中表达
1个回答2022-10-08 09:44
所以一般是用作中间过渡的载体,因为它是靠T-A连接的(T载体上含多个T,读码框未必正确。但是T载体一般不用做表达载体可以的,保证读码框正确),因为它上面有启动子,PCR产物含多聚A),后续要把这段基因...
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3个回答2022-09-12 01:49
可以的,因为它上面有启动子T7/SP6(哪个我忘记了)。 但是T载体一般不用做表达载体,因为它是靠T-A连接的(T载体上含多个T,PCR产物含多聚A),读码框未必正确,所以一般是用作中间过渡的载体,后...
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1个回答2022-10-06 17:41
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请问用PCR克隆已知基因的步骤中为何要将回收的目的基因重组在大肠杆菌质粒上去呢?谢谢啦
5个回答2022-09-14 21:04
1、这是作为保藏的手段,不然你怎么保存你的基因? 2、这是获得自引物之间完整序列的必要途径,因为测序是无法获得待测序列起始部分和约800-1000bps之后的序列,因此需要连接到质粒上测序,俗称TA克...
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