在我做的载体与片段连接中，在转化后，酶切后质粒是不长的，而重组后的长了，可是，最后结果却是。

2022-10-24 08:19

结果是，片段根本没有连进去，连进去的却是一个远远大于我的目的片段的碱基序列，这是为什么呢？（我的目的片段极小）

1个回答

说明你PCR扩增之后回收的条带不对

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1个回答2023-05-22 05:30

都有可能你可以多做几个对照,如空载体转化、空细胞涂板等等，帮助缩问题小范围你可以询问实验室其他人员，看看酶是否有问题，感受态是否有问题，抗生素是否有问题，等等按你给的线索，菌落很少，很有可能是切...

1个回答2022-10-31 22:29

线性化的跑得最慢。质粒酶切后，和没有酶切的对照相比。应该会多出一条带，这条带应该是跑得最慢的，也就是显得比原来的更大。酶切的不彻底的话，原来的那几条带也可能存在wjswj(站内联系TA)酶切之前你看...

1个回答2022-12-27 10:50

酶切前,质粒电泳图一般是三条条带,并认为这三条带从上到下一次是线性、开环、超螺旋.其实可能会比这条带更多些,可以认为是中间复合体状态. 酶切后,因为超螺旋状态的质粒被切成线性,所以条带会有一条条带.如...

2个回答2023-02-22 03:20

我们所说的质粒是指细菌细胞质中的小型环状DNA分子,其作用是控制细菌的次级代谢，而载体是指在基因工程中用以协载目的基因的小型环状DNA分子，载体一般是经过改造的质粒，还可以是动植物病毒的DNA，丰晖...

1个回答2023-01-04 20:31

可能是两个载体互连了,你酶切了跑胶分析一下长度就清楚了. 原因基本跑不了载体互连、多个片段互连,或者根本没提出来,而是把细菌基因组给弄出来了,这样你就要检查一下提质粒的过程,仔细看一下胶上有没有条...

2个回答2022-09-27 14:25

可能是两个载体互连了，你酶切了跑胶分析一下长度就清楚了。原因基本跑不了载体互连、多个片段互连，或者根本没提出来，而是把细菌基因组给弄出来了，这样你就要检查一下提质粒的过程，仔细看一下胶上有没有条带什...

2个回答2022-08-31 16:57

很显然是质粒发生了自连啦。切开的2个质粒连起来了，因此相当于2个质粒的大小。你需采用磷酸化避免自连发生。

1个回答2022-09-24 04:14

很大的区别。

2个回答2022-09-19 16:46

连接产物有:质粒和质粒连，目的基因和目的基因连，质粒和目的基因连. 至于你说的用两种酶切的产物,需要具体看酶的位置关系再作判断,情况就多了

2个回答2023-01-28 07:00

因为转化过程你没出来好加点 kml 再转化提质后分别切2 这样就正确了

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