DNA片段双酶切电泳条带上方有弥散是什么原因
1个回答
首先要问的是你的酶是快酶还是慢酶。如果是快酶,7个小时肯定长了,如果过是慢酶,你要看说明书有没有说切几小时后会出现新活性,也就是几小时后会去切其它位点。你这个情况,我个人猜测是出现新活性后单酶切导致的。也有可能是你的酶量不够,没有切完全。
相关问答
双酶切质粒后电泳 的问题
很显然是质粒发生了自连啦。切开的2个质粒连起来了,因此相当于2个质粒的大小。你需采用磷酸化避免自连发生。
为什么双酶切产物和连接产物电泳后会出现多个条带
应该是PCR的杂带。这种情况的原因可能很多,比如引物设计的特异性不好,或者退火温度不合适等。 应该是PCR的杂带。这种情况的原因可能很多,比如引物设计的特异性不好,或者退火温度不合适等。
构建载体双酶切电泳后比目的片段pcr产物高
可能是质粒在转菌后部分碱基出现错配或者突变导致你酶切的位置发生变化.因为你pcr扩增只是你引物的位置只要不突变就可以正常扩增.建议你做个测序.
我的3个质粒测序结果都正确,但是做双酶切结果只有一个能切下来DNA片段,为什么呢?
这个可能性太多了吧. 这个不好说啊.你得一个条件一个条件的排除
dna双链中的一条链叫什么
DNA分子两条链中只有一条具有转录功能,这条具有转录功能的链叫做模板链或反义链,另一条无转录功能的链叫做编码链或有义链.有义链以基因为准,基因不一定位于那条链上,这个基因的有义链可能是另一个基因的反义...
全文为什么质粒双酶切后显得更大了?
线性化的跑得最慢。 质粒酶切后,和没有酶切的对照相比。应该会多出一条带,这条带应该是跑得最慢的,也就是显得比原来的更大。酶切的不彻底的话,原来的那几条带也可能存在wjswj(站内联系TA)酶切之前你看...
全文DNA复制需要什么酶 各种酶的作用(要很祥细)
在PCR技术中 有热稳定DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶〕它可在50~60℃中进行复制,普通 体内复制DNA需要第恩诶聚合酶〔它起聚合脱氧核糖核苷酸的作用〕,第恩诶解旋酶〔是用于第恩诶双链解旋的〕 ,...
全文质粒双酶切后怎么会这个样子
酶切前,质粒电泳图一般是三条条带,并认为这三条带从上到下一次是线性、开环、超螺旋.其实可能会比这条带更多些,可以认为是中间复合体状态. 酶切后,因为超螺旋状态的质粒被切成线性,所以条带会有一条条带.如...
全文我想问一下从PCR开始有带胶回收双酶切,载体双酶切,胶回收后怎么把载体和酶切后的基因连在一起
我们用天根公司的胶回收试剂盒,回收目的基因及载体双酶切后的产物用于连接,连接体系如下:一般载体1微升,目的基因8微升左右(没.测OD),用T4DNA连接酶(购于TaKaRa公司)1微升,再加酶缓冲液(...
全文PCR条带弥散是什么原因
通常是非特异扩增过多引起,提高退火温度试试 PCR产物放置过久考虑产物降解;如果是PCR后及时上样,考虑引物特异性较差或者模板不纯(包括降解以及掺有别的DNA序列) 如果用PCR产物做模板的话,...
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