Nde I 单酶切后完全没条带了，怎么回事呢

2022-08-13 05:02

1个回答

看着像是降解了，特别是6号，弥散状一片。从1号看酶应该没问题，那么也许是管子脏了、进了点水之类的。另外，6号点样孔发亮，可能有东西没跑下去。
这种电泳质粒应该少加点，否则弱带看不清。

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2个回答2022-09-04 08:38

什么酶呢？最后酶切组的电泳条带是弥散，是只有质粒条带没有酶切产物条带，还是干脆就是空白？如果是弥散，最有可能的是所用的酶的反应条件要求比较严格，因为掌握不当而产生了星号活性，导致把质粒切碎了。建议...

1个回答2024-02-29 06:33

一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并能在特定的切点上切割DNA分子

3个回答2022-10-06 22:15

很显然你的质粒没有构建成功。感觉是连接出了问题，pBI121载体很大，回收比较困难，建议你测一下回收后的浓度。如果太低的话，建议加大酶切量。121载体至少应该达到50-100ng，然后再按1:3-10...

3个回答2022-09-06 01:47

2中可能，1种是你的抗生素失效了，长出来都是没质粒的菌；另1种是你转化进感受态的都是空质粒。 PCR扩增有目的条带可能是因为连接产物残留的PCR片段在平板上引起的假阳性。

3个回答2022-10-03 00:37

菌落PCR能扩增出目的条带，说明目的基因已经连入质粒。而质粒酶切没有条带可能有两个原因： 1.酶切位点有问题，导致切不开，可以看测序结果。 2.酶有问题，或酶切体系有问题，建议重新酶切看有没有...

1个回答2024-03-08 23:00

酶是一种生物催化剂，在一定条件下，高效率地催化各种生物化学反应，促进生物体的专新陈代谢属。生命活动中的消化、吸收、呼吸、运动和生殖都是酶促反应过程。酶是细胞赖以生存的基础。细胞新陈代谢包括的所有化...

1个回答2022-10-31 22:29

线性化的跑得最慢。质粒酶切后，和没有酶切的对照相比。应该会多出一条带，这条带应该是跑得最慢的，也就是显得比原来的更大。酶切的不彻底的话，原来的那几条带也可能存在wjswj(站内联系TA)酶切之前你看...

4个回答2022-11-28 12:12

我们用天根公司的胶回收试剂盒，回收目的基因及载体双酶切后的产物用于连接，连接体系如下：一般载体1微升，目的基因8微升左右（没.测OD）,用T4DNA连接酶（购于TaKaRa公司）1微升，再加酶缓冲液（...

1个回答2023-07-14 19:15

限制性内切酶主要分成三大类。第一类限制性内切酶能识别专一的核苷酸顺序，并在识别点附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的双链，但是切割的核苷酸顺序没有专一性，是随机的。这类限制性内切酶在DNA重组技术或基...

1个回答2022-12-27 10:50

酶切前,质粒电泳图一般是三条条带,并认为这三条带从上到下一次是线性、开环、超螺旋.其实可能会比这条带更多些,可以认为是中间复合体状态. 酶切后,因为超螺旋状态的质粒被切成线性,所以条带会有一条条带.如...

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