限制性内切酶有几类?各有什么特点

2023-07-14 19:15

1个回答
限制性内切酶主要分成三大类。第一类限制性内切酶能识别专一的核苷酸顺序,并在识别点附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的双链,但是切割的核苷酸顺序没有专一性,是随机的。这类限制性内切酶在DNA重组技术或基因工程中没有多大用处,无法用于分析DNA结构或克隆基因。这类酶如EcoB、EcoK等。
第二类限制性内切酶能识别专一的核苷酸顺序,并在该顺序内的固定位置上切割双链。由于这类限制性内切酶的识别和切割的核苷酸都是专一的。所以总能得到同样核苷酸顺序的DNA片段,并能构建来自不同基因组的DNA片段,形成杂合DNA分子。因此,这种限制性内切酶是DNA重组技术中最常用的工具酶之一。这种酶识别的专一核苷酸顺序最常见的是孙启4个或6个核苷酸,少数也有识别5个核苷酸以及7个、9个、10个和11个核苷酸的。第二类限制性内切酶的识别顺序是一个回文对称顺序,即有一个中心对称轴,从这个轴朝二个方向慎凯伍“读”都完全相同。这种酶的切割可以有两种方式。一是交错切割,结果形成两条单链末端,这种末端的核苷酸顺序是互补的,可形成氢键,所以称为粘性末端。另一种是在同一位置上切割双链,产生平头末端。
第三类限宽或制性内切酶也有专一的识别顺序,但不是对称的回文顺序。它在识别顺序旁边几个核苷酸对的固定位置上切割双链。但这几个核苷酸对则是任意的。因此,这种限制性内切酶切割后产生的一定长度DNA片段,具有各种单链末端。这对于克隆基因或克隆DNA片段没有多大用处。
相关问答
限制性内切酶的工作原理
1个回答2024-02-29 06:33
一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并能在特定的切点上切割DNA分子
如何快速读完记住书中主要内容(越短越好,限制4个小时内)急切
1个回答2024-02-15 04:30
不知道你看的什么类的书 记不住是不够集中的问题 你可以在安静的地方读书 读书时候切忌不要神游~! 要跟着书中的内荣走 不要读书时候脑袋想别的(老师一让读课文 我就神游 默读时一边扫字一边神游~...
全文
补鱼大咖切号有限制吗
1个回答2023-10-17 15:21
补鱼大咖切号没有限制。补鱼大咖的玩家可以在游埋知戏设置中去切换账号,玩家首先回到游戏主页面,在游戏主页面中找到设置按钮,点击进.捕鱼大作战换号前提,得有一个小号点击旁液链我的,点运孙击设置退出或者切换...
全文
通过设计带酶切位点的PCR引物来使目的片段添加限制性酶切位点的原理是什么?百思不得其解,请教各位!
3个回答2022-11-05 05:59
不是随意添加。酶切位点都加在引物的5‘端。这样在第一轮扩增后,就会产生有酶切位点的产物了(酶切位点在产物的两端)。在接下来的扩增中每个产物就都会有了。PCR的时候可以耐受引物的5‘端由数个不匹配的碱基...
全文
DNA复制需要什么酶 各种酶的作用(要很祥细)
1个回答2022-10-21 02:36
在PCR技术中 有热稳定DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶〕它可在50~60℃中进行复制,普通 体内复制DNA需要第恩诶聚合酶〔它起聚合脱氧核糖核苷酸的作用〕,第恩诶解旋酶〔是用于第恩诶双链解旋的〕 ,...
全文
今日课堂作业:用同一种限制酶切割运载体和目的基因,他们有哪些连接方式?
1个回答2023-01-22 02:32
具有相同黏性末端的DNA会连接在一起。因此用同一种限制酶切割运载体和目的基因,有3种连接方式:目的基因和目的基因连接、目的基因和运载体连接、运载体和运载体连接。
为什么质粒双酶切后显得更大了?
1个回答2022-10-31 22:29
线性化的跑得最慢。 质粒酶切后,和没有酶切的对照相比。应该会多出一条带,这条带应该是跑得最慢的,也就是显得比原来的更大。酶切的不彻底的话,原来的那几条带也可能存在wjswj(站内联系TA)酶切之前你看...
全文
我想问一下从PCR开始有带胶回收双酶切,载体双酶切,胶回收后怎么把载体和酶切后的基因连在一起
4个回答2022-11-28 12:12
我们用天根公司的胶回收试剂盒,回收目的基因及载体双酶切后的产物用于连接,连接体系如下:一般载体1微升,目的基因8微升左右(没.测OD),用T4DNA连接酶(购于TaKaRa公司)1微升,再加酶缓冲液(...
全文
质粒双酶切后怎么会这个样子
1个回答2022-12-27 10:50
酶切前,质粒电泳图一般是三条条带,并认为这三条带从上到下一次是线性、开环、超螺旋.其实可能会比这条带更多些,可以认为是中间复合体状态. 酶切后,因为超螺旋状态的质粒被切成线性,所以条带会有一条条带.如...
全文
参与dna复制的酶有哪些?各有何作用
1个回答2022-12-18 13:21
na解螺旋酶催化dna双螺旋解链;拓扑异构酶使dna双链多处切断,防止其退火复性,作用是便于dna解链,放出超螺旋张力;单链结合蛋白(ssb)使解链dna保持单链状态;引物酶是dna合成和dna聚合酶...
全文
热门问答