为什么基因测序失败?都提纯了基因,跑了电泳有结果,测序上游引物有成功,下游引物却没有?为什么?
1个回答
1、你测的是片段?引物是自己设计的吗?下游测不出来有可能是引物不佳。之前是否用此引物测过?
2、你的片段多长?必须双向测通吗?如果必须双向的话,不妨连接载体,比如T载体什么的,然后提质粒出来,用载体上的通用引物测,会好一些。
3、实在无法解决,可以让测序公司根据上游的测序结果自行设计引物,多测几个反应,直到测通。这样费用要高一些。
2、你的片段多长?必须双向测通吗?如果必须双向的话,不妨连接载体,比如T载体什么的,然后提质粒出来,用载体上的通用引物测,会好一些。
3、实在无法解决,可以让测序公司根据上游的测序结果自行设计引物,多测几个反应,直到测通。这样费用要高一些。
相关问答
基因测序的目的是什么?有什么作用
个人基因组测序首先可以知道自己的基因组序列,中源协和对比到正常基因组上可以查看是否存在突变与异常,能够检测出基因是否异常,会否导致疾病等,预测疾病风险,价值很大的。
基因测序的目的是什么?有什么作用?
基因测序的目的是:测定未知序列、确定重组DNA的方向与结构、对突变进行定位和鉴定、进行比较研究。
基因测序有什么重要意义
基因测序是一种新型基因检测技术,能够从血液或唾液中分析测定基因全序列,预测罹患多种疾病的可能性,个体的行为特征及行为合理。基因测序技术能锁定个人病变基因,提前预防和治疗。 基因测序相关产品和技术已由实...
全文基因组测序的测序深度一般是多少
基因组测序的测序深度一般是10X。 测序深度是指测序得到的总碱基数与待测基因组大小的比值。假设一个基因大小为2M,测序深度为10X,那么获得的总数据量为20M。 基因测序是一种新型基因检测...
全文基因测序的新里程碑:你的哪些基因来自爸爸,哪
达到百分之九十八就可确认。关于2楼的补充一点跟你说。不管你是男是女,你和你的外祖父母的性染色体可能都不同,甚至你妈妈,因为你妈妈在形成卵细胞时可能会发生染色体交叉互换。就是一条染色体上既有你外公的基因...
全文为什么基因测序前将基因PCR克隆后还要放到大肠杆菌载体上再测序?
补充一个更重要和实际的考虑:实际测序中,可靠的测序结果往往是从引物后二三十个碱基才开始的。如果片段比较长,超过一次测序能力如七八百之外,即使双向测序也无法获得引物(排除非特异扩增)或紧邻引物处的序列时...
全文高通量基因组测序中,什么是测序深度和覆盖度
可以简单理解为深度是一条链上一个碱基检测到的次数, 覆盖度是你检测到的这个样本的总碱基数的百分比
基因测序中,测序深度为猕猴基因组“11.56倍”的覆盖率是什么意思?这里的倍数是什么意思?
假设一个猕猴基因组共有a个碱基,那么这次测序共测出了11.56a个碱基,相当于平均每一个碱基都被测了11.56次。 高通量测序是将基因组随机打断成小于150bp的片段,之后进行拼接,只有提高覆盖率,才...
全文通用引物测序为什么没信号呢
一句话:引物与模板没有结合位点。 要么使用了错误的引物、要是提供了错误的模板序列信息。
什么是深测序和重测序, 以及降解组测序
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