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为什么我们基因克隆老失败？

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为什么我们基因克隆老失败？

2023-01-19 02:19

1个回答

2023-01-19 05:26

1 建议你直接切PCR产物，在酶切位点两端加2~3个保护碱基再切。这样避免两次纯化的麻烦。我都是这么做的。
2 你的T载体连接成功了么？就是有没有拿到重组T载体？
3 你用的是Taq还是高保真聚合酶？如果是Taq的话当心是在引物区或酶切位点造成点突变使得切不动。

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为什么我们基因克隆老失败

3个回答2022-09-26 19:01

1 建议你直接切PCR产物，在酶切位点两端加2~3个保护碱基再切。这样避免两次纯化的麻烦。我都是这么做的。 2 你的T载体连接成功了么？就是有没有拿到重组T载体？ 3 你用的是Taq还是高保真聚合酶？...

怎样克隆基因或是克隆基因的一般步骤是什么？

1个回答2022-09-09 10:50

一般情况下有两种方法：一、反转录法：用已知的单链mRNA反转录出一条单链的DNA，再用碱基互补配对原则合成双链DNA。二、用已知的蛋白质的多肽链推测出单链mRNA（一个氨基酸对应相应的密码子）上碱基的...

基因克隆不出来，为什么

1个回答2022-09-01 13:52

基因克隆是70年代发展起来的一项具有革命性的研究技术，可概括为∶分、切、连、转、选。最终目的在于通过相应技术手段，将目的基因导入寄主细胞，在宿主细胞内目的基因被大量的复制。

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　　选择目的基因,并设计相应引物；　　用引物PCR扩增目的基因片段；　　选择合适（抗性标记、酶切位点等）的克隆载体（为了保真扩增）,并将PCR片段连接入克隆载体中；（一般用Taq酶的PCR产物在末...

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怎样克隆一个目的基因?

2个回答2022-09-14 09:25

要有目的基因、引物、DNTP、去离子水、Taq酶、以合适的浓度加到离心管里，在PCR仪上克隆

基因克隆探针

1个回答2023-07-16 07:41

这种探针是利用已知基因经过互补配对设计的单链DNA

面基（网友见面）失败是怎样一种体验

1个回答2024-02-22 06:42

我见过不少网友，我没有抱着相亲的态度，就是想多认识一些朋友，感觉见面后也能聊到一起的，就继续做朋友，聊不到一起的，就见光死喽。其实网友之间见不见都无所谓。看你的心态，心情了！！

克隆人怎么克隆出来的？

1个回答2024-03-02 07:30

人类已经完全掌握了克隆技术，克隆已经非常普遍。人类不想做的事情，就会让克隆人去做。克隆也十分简单：只需要把头发放进机器中，几分钟就能克隆出一个人。但是到底要不要克隆人呢？答案是肯定的——不要。虽...

如果你会克隆,你最想克隆什么?

1个回答2022-09-19 07:49

肺，可以增加肺活量

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