为什么要先构建克隆载体再用表达载体

2023-02-22 22:55

2个回答

这样才能选取合适的克隆载体，提高克隆效率，增大表达量，从而高效的得到所需的表达产物。

你最早的目的基因、质粒什么的都是拿去公司合成的，很少量，所以要先克隆，把它变多，再做实验，去表达

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1个回答2023-02-22 10:20

如果不克隆如载体，基因本身是一段DNA，很难转染到受体细胞中，即使转入受体细胞，也不能筛选转染成功的细胞。

1个回答2022-08-28 03:42

用限制酶分别切割目的基因两侧及运载体，然后在DNA连接酶的作用下就形成了基因表达载体。

1个回答2022-10-06 04:39

我做过几个克隆，没用过T载体，直接将酶切后纯化的产物进行连接，照样可以连接成功，基本上都会有10-50个克隆长出来。我用的是Sal I和Nde I这两个酶切位点，似乎这两个都是平端的哦。

1个回答2022-10-14 01:00

载部首笔划：4 总笔划：10 繁体字：载汉字结构：半包围结构简体部首：车造字法：形声笔顺：横竖横横折竖横折撇捺

2个回答2023-05-28 12:02

基因克隆上去没有原因，克隆不上去就不好说清楚了。对于这种情况，直接交给专业的公司做就行了，也就千把块钱，时间也就是1-2周。我们实验室是在禾船生物克隆的，非常便捷。

1个回答2022-12-07 06:01

选择目的基因,并设计相应引物；用引物PCR扩增目的基因片段；选择合适（抗性标记、酶切位点等）的克隆载体（为了保真扩增）,并将PCR片段连接入克隆载体中；（一般用Taq酶的PCR产物在末尾会自带一个...

3个回答2022-09-07 05:22

首先需要一个表达载体，看你需要原核还是真核，看情况选择，然后有获得你需要的目的基因，在两端加酶切位点，将目的基因与载体连接到一起后就完成了质粒载体的构建了。

1个回答2023-01-08 02:24

有两种常用的方法。第一种是直接将PCR扩增的基因片段酶切，然后连接到酶切过的表达载体上。第二种是先把PCR产物连到过度载体上，再从过度载体抢切下目的基因，最后再连接到酶切过的表达载体上。

2个回答2022-11-29 08:15

第一个问题，只有一个碱基缺失，克隆测序和引物合成都没有问题；第二个问题：酶切连接入载体后，克隆过程就完成了；第三个问题：如果你说的是转化过程的话，应该是先做好连接，再做转化。

1个回答2023-01-23 11:35

faded这个就不错

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