真核生物中分离到的完整的基因片段与表达载体构成的重组质粒转化入大肠杆菌后，不能获得表达的原因？

很大的区别。

所以一般是用作中间过渡的载体,因为它是靠T-A连接的（T载体上含多个T,读码框未必正确。但是T载体一般不用做表达载体可以的,保证读码框正确）,因为它上面有启动子,PCR产物含多聚A）,后续要把这段基因...

pcDNA3.1本身就有抗性，可以用抗性培养基进行初步筛选，然后长出来的克隆筛选，一般为三种： 1.设计扩增外源基因片段的引物，进行菌液PCR 2.提取质粒，做质粒双酶切--Hind Ⅲ和EcoRⅠ（...

可以的，因为它上面有启动子T7/SP6（哪个我忘记了）。 但是T载体一般不用做表达载体，因为它是靠T-A连接的（T载体上含多个T，PCR产物含多聚A），读码框未必正确，所以一般是用作中间过渡的载体，后...

不会 因为酶是具有专一性 只能在特定的切点切

用钙离子处理细胞.目的是将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程.

细菌可以在某种条件下形成感受态，然后可以接受外界基因，而动物细胞的感受态很难做，或者干脆需要注射；另外细菌的细胞可以无限繁殖，动物细胞不可以。。。 细菌转化的局限性在于，真核生物和原核生物的表达是不同...

生物体对密码子的偏爱性： 不同的生物，甚至同种生物不同的蛋白编码基因，对于同一氨基酸所对应的简并密码子，使用频率并不相同，也就是说生物体基因对简并密码子的选择具有一定的偏爱性。决定这种偏爱性的因素有三...

在基因工程中,携带目的基因进入宿主细胞进行扩增和表达的工具称为载体,载体实际上是具有运载能力的DNA.依据功能,载体可以分为克隆载体和表达载体.克隆载体用于在宿主细胞中克隆和扩增外援片段；表达载体则用...

真核生物与原核生物的启动子不同。而且真核生物的基因通常是间隔基因，即外显子和内含子相间排列。真核生物的完整基因直接转入大肠杆菌，没用相应的启动子不能启动mRNA转录，而且内含子也不能正确剪切，当然不能...